Test de Antidepresivos Tricíclicos

 
 
PRUEBA DE ANTIDEPRESIVOS TRICICLICOS EN UN SOLO PASO EN PLACA (ORINA)
 
USO INDICADO
La Prueba TCA de Antidepresivos Tricíclicos en Un Solo Paso en Placa (Orina) es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral para la detección de Nortriptilina (metabolito de los Antidepresivos Tricíclicos) en orina en concentraciones del cut-off de 1.000 ng/ml. Esta prueba detecta también otros compuestos relacionados con los Antidepresivos Tricíclicos, para lo que puede dirigirse a la relación que aparece en el apartado de Especificidad.
Esta técnica únicamente proporciona un resultado analítico preliminar cualitativo. Para obtener la confirmación de un resultado, debe emplearse un método químico alternativo más específico. El método preferido para confirmación, es el GC/MS (Cromatografía gaseosa/Espectrometría de masas) o Cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC). La consideración clínica y el buen juicio profesional deben aplicarse a cualquier resultado de prueba de drogas de abuso, en particular cuando se utilizan resultados preliminares positivos.
 
 
RESUMEN
Los TCA (Antidepresivos Tricíclicos) se utilizan normalmente para el tratamiento de enfermedades de tipo depresivo. Una sobredosis de TCA puede originar depresiones profundas del sistema nervioso central, cardiotoxicidad, así como efectos anticolinérgicos, de manera que una sobredosis de TCA es la causa más frecuente de muertes originadas por medicamentos que se expenden con receta. A veces los TCA se aplican por vía parenteral mediante inyección, y se metabolizan por el hígado, siendo excretados en la orina mayoritariamente en forma de sus metabolitos durante un periodo de hasta 10 días desde que se tomaron.
La Prueba TCA de Antidepresivos Tricíclicos en Un Solo Paso en Placa (Orina) es una prueba rápida de screening que puede realizarse sin la necesidad de utilizar ningún instrumento. Emplea un anticuerpo monoclonal para detectar de manera selectiva niveles elevados de Nortriptilina en orina y proporciona resultados positivos cuando el nivel de Nortriptilina en orina supera los 1.000 ng/ml.
 
 
PRINCIPIO
La Prueba TCA de Antidepresivos Tricíclicos en Un Solo Paso en Placa (Orina) es un inmunoensayo cromatográfico rápido basado en el principio de uniones competitivas. La droga que puede estar presente en la muestra de orina compite frente al conjugado de la misma en los puntos de unión al anticuerpo. Durante la prueba la muestra de orina migra hacia arriba por acción capilar. Si los Antidepresivos Tricíclicos se encuentran presentes en la orina en concentración inferior a la del cut-off, no saturarán los puntos de unión de las partículas recubiertas de anticuerpo en la placa de la prueba. Las partículas recubiertas de anticuerpo serán capturadas por el conjugado inmovilizado de Antidepresivos Tricíclicos y una línea visible de color aparecerá en la zona de la prueba. Esta línea de color no se formará en la zona de la prueba si el nivel de Antidepresivos Tricíclicos está por encima de la del cut-off porque saturarán todos los puntos de unión de los anticuerpos de anti-Antidepresivos Tricíclicos.
Una muestra de orina positiva no generará una línea de color en la zona de la prueba debido a la competencia de la droga, mientras que una muestra de orina negativa o una muestra con una concentración inferior a la del cut-off generará una línea en la zona de la prueba. Para servir como procedimiento de control, una línea coloreada aparecerá siempre en la zona de control si la prueba ha sido realizada correctamente y con un volumen adecuado de muestra.
 
 
REACTIVOS
La prueba contiene anticuerpos monoclonales de ratón anti-Antidepresivos Tricíclicos unidos a partículas y conjugados de proteína-Antidepresivos Tricíclicos. Un anticuerpo de cabra se emplea en el sistema de la línea del control.
 
 
PRECAUCIONES
• Solo para el uso médico y otro profesional de diagnóstico in vitro. No usar después de la fecha de caducidad.
• La prueba debe permanecer en la bolsa sellada hasta el momento de su empleo.
• Todas las muestras deben ser consideradas como potencialmente infecciosas y deben manejarse de la misma forma que los agentes infecciosos.
• La prueba, una vez utilizado, debe desecharse de acuerdo con las regulaciones locales.
 
 
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Almacenar tal como está empaquetado en la bolsa sellada a temperatura ambiente o refrigerado (2-30°C). La placa de análisis es estable hasta la fecha de caducidad que figura en la bolsa. La placa de análisis se mantendrá en la bolsa sellada hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar después de la fecha de caducidad.
 
 
OBTENCION Y PREPARACION DE MUESTRAS
Valoración y obtención de la muestra:
• Se debe tomar la muestra de orina en un envase limpio y seco. Se pueden usar muestras de orina recogidas en cualquier momento del día. Aquellas muestras que presenten partículas visibles deberían ser centrifugadas, filtradas o permitir que sedimenten para obtener una muestra clara para realizar la prueba.
Almacenamiento de las Muestras:
• Las muestras de orina pueden ser almacenadas entre 2 y 8ºC hasta 48 horas previas a la realización de la prueba. Para un periodo más prolongado se deben congelar a -20ºC. Las muestras congeladas deben alcanzar la temperatura ambiente y mezclarse bien antes de realizar la prueba.
 
 
MATERIALES
Materiales Suministrados:
   • Placas
   • Cuentagotas
   • Ficha técnica
Materiales Requeridos no Suministrados:
   • Contenedor para la recogida de la muestra
   • Cronómetro
 
 
INSTRUCCIONES DE USO
Permita que la prueba, la muestra de orina, y/o los controles estén a temperatura ambiente (15-30°C) antes de realizar la prueba.
1. Llevar a temperatura ambiente la bolsa del kit antes de abrirlo. Sacar la placa de la bolsa sellada y usarla lo antes posible.
2. Colocar la placa en una superficie limpia y lisa. Tomar con el gotero la muestra, y colocándolo en posición vertical, añadir 3 gotas de orina (100 µl) en el pocillo de la muestra (S) y poner el cronómetro en marcha. Evitar que queden atrapadas burbujas de aire en el pocillo de muestra.
3. Esperar a que aparezcan las líneas rojas. Los resultados deberán leerse a los 5 minutos. No interpretar resultados pasados 10 minutos.
 
 
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Negativo:(*) Aparecen dos líneas. Una línea roja debe estar en la zona del control (C) y otra línea roja o rosa aparecerá en la zona de la prueba (T). Este resultado negativo indica que la concentración de Antidepresivos Tricíclicos está por debajo del nivel detectable.
NOTA: La intensidad del color rojo de la línea de la región de la prueba (T) puede variar, pero cualquier coloración roja, por muy débil que sea, deberá considerarse como resultado negativo.
Positivo: No aparecerá ninguna línea en la zona de la prueba. Este resultado positivo indica que la concentración de Antidepresivos Tricíclicos excede los niveles detectables.
No válido - inválido: No aparece la línea de control. Un volumen de muestra insuficiente o un procedimiento incorrecto son las posibles razones de la ausencia de la línea de control. Revise el procedimiento y repita la prueba usando una nueva prueba. Si el problema persiste, deje de utilizar ese lote y contacte con su distribuidor local.
 
 
CONTROL DE CALIDAD
Un control interno está incluido en el prueba. La línea roja que aparece en la región de control (C) es considerada como un procedimiento de control interno. Confirma que se ha utilizado un volumen suficiente de muestra y se ha realizado correctamente la técnica.
No se suministran controles estándar con el kit, sin embargo, se recomienda realizar controles positivos y negativos como buena práctica de laboratorio para verificar tanto el procedimiento como el comportamiento de la prueba.
 
 
LIMITACIONES
1. La Prueba TCA de Antidepresivos Tricíclicos en Un Solo Paso en Placa (Orina) proporciona sólo un resultado analítico preliminar cualitativo. Debe emplearse un segundo método analítico para confirmar el resultado. Cromatografía de gases y Espectrometría de masas (GC/MS) o Cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC), son los métodos analíticos más apropiados para la confirmación.
2. La Prueba TCA de Antidepresivos Tricíclicos en Un Solo Paso en Placa (Orina) es un ensayo de screening cualitativo y no puede determinar el nivel de concentración de droga en la orina, ni el nivel de la intoxicación.
3. Es posible que errores técnicos o de procedimiento, así como otras substancias que interfieren, presentes en la muestra de la orina, pueden causar resultados erróneos.
4. Adulterantes como lejía y/o el alumbre en la muestra de orina, pueden producir resultados erróneos independientemente del método analítico usado. Si se sospecha adulteración, la prueba deberá repetirse con otra muestra de orina.
5. Un resultado positivo indica presencia de la droga o de sus metabolitos, pero no indica el nivel de intoxicación, la vía de intoxicación o la concentración de droga en la orina.
6. Un resultado negativo no necesariamente indica la ausencia de droga en la orina. Pueden obtenerse resultados negativos cuando la droga está presente pero en niveles inferiores a los del cut-off de la prueba.

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